Amplification virale
La réalisation d'une production efficace en cellules d'insecte nécessite une étape d'amplification et de préparation d'un stock viral à haut titre.
Quelque soit l'origine de votre Baculovirus recombinant, fourni par votre laboratoire ou produit par nos soins, nous serons en mesure de l'amplifier à l'échelle requise pour constituer un inoculum pur ayant un titre viral compatible avec un procédé de production efficace.
Les étapes qui peuvent être réalisées pour l'amplification :
- Clonage viral par plages de lyse et contrôle du génome. Cette étape est optionnelle mais peut s'avérer nécessaire pour des recombinants anciens ayant subit plusieurs cycles d'amplification, ou pour des virus dont l'historique présente des inconnues, ou encore pour des virus présentant une instabilité génétique.
- Amplification sur cellules Sf9 dans le milieu le mieux adapté jusqu'au volume requis (de quelques ml à plusieurs dizaines de litres)
- Détermination du titre viral en PFU/ml
- Dans le cas d'une utilisation des virus pour la transduction de cellules de mammifères, il est parfois requis de concentrer les stocks viraux pour réduire le volume de l'inoculum et/ou pour changer le milieu.
Le stade de l'amplification virale est souvent une excellente occasion pour réaliser une mise en stock à très long terme de votre clone viral recombinant.